イオンクロマトグラフィーによる油糧種子作物の糖成分の定量

この研究では,イオン染色体を用い,油菜の果糖,グルコース,サクラソス,スタキオス,ラフィノスの含有量を決定する.作者は,アンペルメトリック検出器を装備したWaealイオン染色体計を使用したこの方法には,単純な予備処理,優れた回復,および高い感度があり,フルクトースの決定に適しています.,標準に規定する油性種子のグルコース,サクラース,スタキオース,ラフィノース含有量

キーワード: 油脂,イオン染色体,砂糖

1道具と反応剤

1.1 イオン染色体の構成リスト

表 1 計器配置リスト

1.2 反応剤と標準溶液

表 2 反応剤と基準表

1.3 実験用材料と補助機器

フィルタリング設定

超音波クリーナー

分析バランス (精度0.0001g)

一回用注射器 (2ml)

水性注射器フィルター (0.22μm)

超純水,抵抗力 18.2 MΩ·cm (25°C)

2実験方法

2.1 溶液の調製

2.1.1 亜鉛アセタート溶液 (1mol/L): 亜鉛アセタートの21.9gを重量化し,氷酸乙酸の3mLを加え,溶かして水で100mLまで稀釋する.

2.1.2 硫酸カリウム溶液 (1mol/L): 10.6gの硫酸カリウムを重量化し,溶かして水で100mLまで稀釋する.

2.1.3 ナトリウムヒドロキシード溶液 (200mmol/L): 50%のナトリウムヒドロキシード溶液の10.5mLを測定し,予備脱ガス水で1000mLまで稀釋し,窒素ガスで保護する.

2.2 サンプル予備処理

2.2.1 抽出サンプル

試料の5gを重量化して (精度0.1mg) 50mlの遠心分離管に詰め込み,25mLの石油エーテルを加え,1分間渦巻いて,2000r/minで5分間遠心分離します.そして,石油エーテルの上層層を捨てます上記手順を2回繰り返す.残留した石油エーテルを60°Cの水浴で蒸発させ,試料をガラス棒を使用して150mlの円筒球に (以前は常量まで) 移します.遠心分離管を50mlの水で2回洗浄する.円筒球に洗浄剤を混ぜて ゆっくりと亜鉛アセタート溶液5mlとポタシウムフェロシアン化溶液5mlを加えます溶液の総質量が約100gになるまで水を加える (1mgの精度)室温で30分間混ぜた後,質の高い迅速フィルター紙で溶液をフィルタリングする.さらに,0.22μmの注射器フィルターでフィルタリングして試験サンプルを取得する.同時に試料の空白で検査します

2.3 実験条件

2.3.1 クロマトグラフィーの条件

移動相:A: 200mM NaOH;B:水;C: 20mM NaOH

流量: 0.4mL/分

動作時間: 65分

コラム温度: 30°C

検出ゾーンの温度: 30°C

検出器 金電極 砂糖 4倍ポテンシャル

インジェクション体積: 10μL

表 3 グラディアントエルーション

3実験の結果

3.1 標準色素図

5つの砂糖の分離は 20分以内に完了しました すべてのピークは良好な形を示し 尾根現象はありません実験的決定の要件を満たす.

図1 5 糖分 (0.5 mg/L) の染色体

表 4 システムの適性に関する結果

3.2 線形範囲

混合標準溶液の適切な量を採取し,標準曲線を構成するための濃度シリーズを準備するためにシリアル稀释を行います.線形範囲は0.05~20mg/Lです.線形検出結果と既知の濃度間の偏差は最大許容される偏差より小さい.R2 の値は 0.99985 から 1 までです.00000すべてのコンポーネントに優れた線形性を示しています.

表 5 各化合物の線形範囲表

図 2 5 種類の砂糖の線形結果

3.3 精度

ソーヤ豆のサンプル溶液は,セクション2に従って抽出されました.2.1 そして,第2節に規定する計測条件で分析する.3.1 連続して6回の注射で.結果は下記の表に示されています. ソーヤ豆サンプル内の5つの砂糖の相対標準偏差 (RSD) はすべて1%以内でした.サンプル検出は信頼性がある精度が高いことが示されています.

表 3 ソーヤ豆のサンプル精度結果

図 3 4 種類の砂糖の重複染色体 豆の精度

3.4 サンプル試験結果

3.4.1 湿度検出

試験対象の大豆と芝生サンプルを採取し,GB/T 14489に従ってサンプル内の水分含有量を決定する.1結果は以下の表に示されています.

表 4 サンプル水分値

3.4.2 試料検査

試験対象の大豆と芝麻のサンプルを採取し,セクション2に従ってサンプル溶液を抽出します.2.12 節に規定する儀器条件で注射分析を行う.3.1サンプル検査結果は下記の表に示されています. ソーヤ豆と芝生サンプルの検出は信頼性があり,結果は満足します.

表 5 サンプル試験結果

図 4 ソーヤ豆のサンプルを200倍稀释した試験染色体

図 5 100 倍稀释された芝麻サンプルのテスト染色体

4結論

この方法では,フルクトース,グルコース,塩基を測定するためのイオン染色体測定法を確立するために,アンペルメトリック検出器を装備したWayealイオン染色体検査IC6300シリーズシステムを使用します.サクラース試料は前処理で処理され,イオン染色体分析列で分離され,外部標準方法を用いて定量化されました.フルクトーズの定量および質的分析を可能にする塩基配列の塩基配列は,塩基配列は,塩基配列の塩基配列の塩基配列の塩基配列の塩基配列を,感度が国家標準の要件を満たしている線形相関係数は全て0を超えています999これは,この方法とWanyealのイオン染色体系が結合して,標的サンプルに対する通常の定量および定量検出要件を満たしていることを示しています.