飲料中のカフェイン含有量を液体染色体検査によって決定する

事件の詳細

カフェインは天然のメチルキサンチンアルカロイドで,コーヒー豆,茶葉,カカオ豆などの原材料に広く含まれています.商用飲料のコア機能添加物と特徴的な味の化合物として使用カフェインの適度な摂取は,心を爽快して疲労を軽減するような生理的な効果を与えることができます.しかし過剰で長期間の消費は,心臓の鼓動,不眠,神経の過興奮性などの副作用を容易に引き起こす可能性があります.さらに,妊娠中の女性などの敏感な集団では,子供心血管疾患の患者には,さらに低い耐受性限界があります.様々な国の食品安全基準は,飲料中のカフェイン含有量に関する明確な規制制限を確立しています.

中国では"飲料中のカフェインの決定" (GB 5009.飲料マトリックスにおけるカフェインの定量決定の法定基準として使用される.高性能液体染色体 (HPLC) は,優れた解像度,マトリックス干渉に強い抵抗力,高定量精度により,複合マトリックスサンプルを分析するための選択方法になりました混合飲料,ミルクを含む飲み物,植物性機能飲料を含む.この実験は,国家標準GB 5009に規定された高性能液体染色体検査方法に従って実施された..139-2014 飲料サンプルのサンプル予処理と液体染色体分離/検出プロトコルの確立異なる種類の飲料におけるカフェインの定性識別と定量分析を完了する.

キーワード: 高性能液体染色体; カフェイン; 飲料; 含有量決定

1道具と反応剤

1.1 液体染色体系構成リスト

表 1 計器配置リスト

違う違う	名前	Qty
1	LC3500液体染色体検査システム	1
2	P3500B 二重高圧グラディアントポンプ	1
3	CT3500 コラムオーブン	1
4	AS3500 超高性能オートサンプラー	1
5	スマートラボ CDS 2.0 染色体データステーション	1
6	C18 コラム,5μm,4.6 × 250 mm	1

1.2 反応物質と基準リスト

表 2 反応物質と基準のリスト

違う違う	反応剤または基準基準	純度度
1	メタノール	LCグレード
2	超純粋な水	ほら
3	マグネシウム酸化物	ARグレード
4	トリクロオエセト酸	ARグレード

1.3 実験用材料と補助機器

超音波クリーナー

渦巻きミキサー

0.45μm 微孔状の水性相フィルター膜

2実験方法

2.1 標準溶液の準備

2.1.1 カフェイン標準ストック溶液 (2.0mg/mL): 20mgのカフェイン基準を (最も近い0.1mg) 10mLの体積計球に正確に重量化し,溶かしてメタノールで体積まで補う.冷蔵庫に保存する°C 保存期間は6ヶ月です

2.1.2 カフェイン標準中間溶液 (200μカフェイン標準ストック溶液の5.0mLを正確に転送する (2.1.1) 50mlの体積計球に詰め込み,水で体積まで補う.冷蔵庫で4°Cに保存する.°C 保存期間は1ヶ月です

2.1.3 カフェイン標準作業溶液カリブレーション曲線: カフェイン標準中間溶液の0.5 ml,1.0 mL,2.0 mL,5.0 mL,10.0 mLを転送する (2.1.2) 10 ml の別々の体積計球に詰め,水で体積まで満たす.この標準シリーズの結果の濃度は10である.0μ20g/mL0μg/mL,40でした0μg/mL 100μ200g/mL,およびμ使用直前に準備する.

2.2 サンプル予備処理

2.2.1 コラ類の飲料

(a) 脱ガス: 40 °C で超音波クリーナーを使用してサンプルをソニック化°Cは5分

(b) 浄化:サンプルを5g (精度0.001gまで) を重量化し,5mLの体積計球に移します.水で体積まで補う (試料溶液のカフェイン含有量が校正曲線範囲内にあることを確認する). よく混ぜて,0. 5gのマグネシウムオキシードを加え,よく揺れて,立ち止めてください.上層剤を取り,微孔膜を通ってフィルタリングして,後で分析します.

2.2.2 牛乳を含む液体コーヒー・紅茶製品

試料の1gを重量化して (精度0.001gまで) 10mlの体積計球に移動します.そして,三塩酸溶液で体積まで補う (試料溶液のカフェイン含有量が校正曲線範囲内にあることを確保する)精密に混ぜて,タンパク質の降水を待機させ,上層物質を取り出し,微孔膜を通過し,後の分析のためにフィルタリングします.

2.3 実験条件

2.3.1 クロマトグラフィー条件

コラム:C18,46×250mm,5μm

移動相:メタノール/水 = 24/76 (v/v)

流量: 1.0 mL/min

コラム温度: 25°C について

検出波長: 272nm

インジェクション容量: 10μL について

3実験の結果

3.1 空っぽ