メチオニンヒドロキシアナログの決定 ワイアルの高性能液体染色体
2026-09-01
メチオニン水酸化アナログ (MHA) は,メチオニンの代替として飼料産業で広く使用されている有機酸添加物である.MHAは家禽 (ブローカーやシロ) の飼料に広く使用されています.豚 (豚仔と豚の仕上げ)メチオニンの代替として,飼料コストの削減に重要な効果を示しています.動物の腸環境を改善する動物の免疫力も強化します
高性能液体色素学とUV検出は,優れた分離効率により,様々な複雑な飼料サンプルを分析するのに適しています.強いマトリックス干渉耐性高い検出感度,安定した信頼性の高い定量的な結果.この実験は"高性能液体染色体学による飼料におけるメチオニン水酸化同類の決定"規格 (GB/T 19371-2025) に準拠して実施された.. A Wayeal LC3400 series high performance liquid chromatograph equipped with a UV detector was employed to validate the sample pretreatment procedure and the liquid chromatographic separation and detection systemメチオニンヒドロキシアナログの質的検出と精密な定量分析を様々な種類の飼料サンプルで可能にします.
キーワード:フード メチオニンヒドロキシアナログ 高性能液体染色体
1道具と反応剤
1.1 HPLC構成リスト
表 1 高性能液体染色体システム構成リスト
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違う 違う |
モジュール式 |
Qty |
|
1 |
UV3400 UV検出器 |
1 |
|
2 |
P3400B 二重高圧恒流ポンプ |
1 |
|
3 |
CT3400 コラムオーブン |
1 |
|
4 |
AS3400 オートサンプラー |
1 |
|
5 |
スマートラボ CDS 2.0 クロマトグラフィーデータシステム |
1 |
1.2 反応物質と基準基準のリスト
表 2 反応剤と基準基準のリスト
|
違う 違う |
反応剤または基準基準 |
純度 |
|
1 |
アセトニトリル |
HPLCグレード |
|
2 |
メチオニンヒドロキシアナログの基準規格 |
ほら |
|
3 |
カリウムヒドロキシド |
ARグレード |
|
4 |
リン酸 |
HPLCグレード |
1.3 液体染色体検査条件
表 3 高性能液体染色体検査条件
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パラメータ |
条件 |
|
クロマトグラフィック・コラム |
C18,4.6 × 250mm, 5 μm |
|
流量 |
1.0mL/分 |
|
コラム温度 |
30 °C |
|
移動段階 |
水/アセトニトリル/アシド=95: 5: 0.05 (v/v/v) |
|
検出波長 |
210nm |
|
注射量 |
20μL |
1.4 実験用材料と補助機器
超音波クリーナー
渦巻きミキサー
高速遠心機
分析バランス
シェイカー
2実験方法
2.1 溶液の調製
2.1.1 標準曲線の解答:
適切な量のメチオニンヒドロキシアナログ基準量を正確に重量化し,10%アセトニトリルに溶解し,質量濃度0の標準溶液を準備する.51 について02 について05 について010 について020歳040歳0そして80.0μg/mL.各標準溶液の5mLを15mLの塞がれた試験管に個別に正確に移します.精密に0.1mLの50%のカリウムヒドロキシード溶液を入れて,15秒間渦を巻きます.そして0を正確に足します..2ml 50%のリン酸溶液,さらに15秒間渦巻く. 8000r/minで5分間遠心分離.分析の前に微孔膜フィルターを通過させる.
2.1.2 試験サンプル溶液:
5gの飼料サンプルを容器に重量化し,10%アセトニトリル溶液50mLを加え,30秒間混ぜます.シャイカーの上に置いて30分間揺れます.8000r/minで5分間遠心分離します.そして,後使用のために,上位剤を保持します.. 上記の上位剤の5mLを15mLの塞がれた試験管に正確に移します.50%のカリウムヒドロキシード溶液の0.1mLと渦を15秒間正確に追加します.その後,正確に0を加えます.50%のリン酸溶液の2mL,さらに15秒間の渦. 半導体から8000r/minで5分間離離します. 微孔膜フィルターを通過して分析します. 2つの並列試験サンプル溶液を準備します.
2.1.3 復元試験溶液:
精密に2.5mLのサンプル上位剤と2.5mLの各標準シリーズ溶液を15mLの塞がれた試験管に移動します.精密に0を加えます.50%のカリウムヒドロキシード溶液1mlと15秒間の渦精度で0.2mLの50%のリン酸溶液と渦をさらに15秒間加え,5分間8000r/minで遠心分離します.分析の前に,超生体物質を微孔膜フィルターを通す..
3実験の結果
3.1 直線性と範囲
表 4 標準曲線濃度表
|
コンポーネント名 |
カーブ1 |
カーブ2 |
カーブ3 |
カーブ4 |
曲線5 |
カーブ 6 |
カーブ7 |
カーブ8 |
|
メチオニンヒドロキシアナログ (μg/mL) |
0.5 |
1.0 |
2.0 |
5.0 |
10.0 |
20.0 |
40.0 |
80.0 |
図 1 メチオニンヒドロキシアナログの標準曲線
注:メチオニンヒドロキシアナログの基準標準溶液の適切な量を採取し,標準曲線の作成のために一連の濃度まで連続的に稀釋した.線形範囲は0でした.5ほら80.0μ関連系数 (R) は0でした.99983分析剤の優れた線性を示しています.
3.2 精度
図 2 基準標準 (20,0μg/mL) の精度試験の重複染色体
表 5 基準標準 (20,0μg/mL) の精度試験データ
|
複合名 |
保存時間 (分) |
ピークエリア (mAU) |
|
メチオニンヒドロキシアナログ |
17.767 |
229.577 |
|
17.782 |
228.029 |
|
|
17.788 |
229.165 |
|
|
17.791 |
230.666 |
|
|
17.805 |
229.887 |
|
|
17.807 |
230.011 |
|
|
平均 |
17.79 |
229.556 |
|
SD |
0.015 |
0.898 |
|
RSD (%) |
0.084 |
0.391 |
注: メチオニンヒドロキシアナログの基準基準 (濃度20.0μ保持時間の繰り返し性 (RSD) は0.084%であり,ピークエリアの繰り返し性は0.391%であり,計測器の精度が良好であることを示しています.
3.3 回収
図3 飼料中のメチオニンヒドロキシアナログの復元試験の重複染色体
表 6 飼料中のメチオニンヒドロキシアナログの復元試験データ
|
化合物 |
サンプル |
A について |
回復 (%) |
|
メチオニンヒドロキシアナログ |
溶媒 |
ほら |
ほら |
|
空っぽ |
ほら |
ほら |
|
|
サンプル1 |
7.424 |
ほら |
|
|
スピーク |
420.793 |
ほら |
|
|
40 |
470.948 |
88.56 |
注: 40 の濃度で基準基準でサンプルを混ぜた.0μ復元率は88.56%で,この方法の精度が良好であることを示しています.
3.4 検出限界 (LOD)
図 4 メチオニンヒドロキシアナログ標準の染色体図 (2.5μ(g/mL)
表 7 メチオニンヒドロキシアナログの基準規格の試験データ (2.5μ(g/mL)
|
複合名 |
保存時間 (分) |
ピークエリア (mAU) |
信号とノイズ比 |
濃度 (μg/mL) |
騒音 (mAU) |
|
メチオニンヒドロキシアナログ |
17.765 |
28.265 |
228.780 |
2.5 |
0.012 |
注:上記の表に示すように,メチオニンヒドロキシアナログの基準標準の2.5μg/mLでの試験データに基づいて,理論的検出限界 (LOD) は0と計算された.033μg/mL シグナル/ノイズ比 3 (S/N = 3) で.
3.5 飼料サンプルの試験
図 5 飼料サンプルの染色図
注: メチオニンヒドロキシアナログは0の濃度で飼料サンプルで検出されました.402μg/mL
4結論
この実験は"高性能液体染色体測定法による飼料におけるメチオニン水酸化アナログの決定"規格 (GB/T 19371-2025) に準拠して実施された.紫外線検出器を搭載したWayeal LC3400シリーズ高性能液体染色体実験結果は,目標ピークが良好な対称性と高い理論プレート数を示したことを示した.5ほら80.0μ関連系数 (R) は0以上でした.9998MHA基準基準 (20. 保存時間とピークエリアのRSD値は,0μMHA の回収率は40点に達した.この結果として,MHA の回収量は,0μMHA の理論的検出限界 (LOD) は0であることが決定された.033μMHAは0の濃度で飼料サンプルで成功的に検出されました.402μ上記すべてのデータは,薬典法による儀器性能の要件を満たしています.
